peprotech细胞因子操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀
。不要使液体产生大量的泡沫










，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差
。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数
。每个标准品和空白孔建议做复孔

。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔



。标本用标本稀释液1
：1稀释后加入50ul于反应孔内
。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔
、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体


。盖上膜板，轻轻振荡混匀


，37℃温育1小时
。

4． 甩去孔内液体
，每孔加满洗涤液

，振荡30秒

，甩去洗涤液



，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次

。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀




，37℃温育30分钟
。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒
，甩去洗涤液

，用吸水纸拍干

。重复此操作3次

。如果用洗板机洗涤

，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul
，轻轻振荡混匀


，37℃温育10分钟
。避免光照
。

8． 取出酶标板

，迅速加入50ul终止液

，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值




。